2025年高考植物組織培養(yǎng)
來源：網(wǎng)絡整理 2024-11-19 15:36:25
1實驗室的準備工作
本實驗需要作好三項實驗準備：一是提前配制各種母液；二是提前準備MS培養(yǎng)基；三是選擇外植體并進行預處理。
1.1配制母液
母液中含有大量元素、微量元素、激素（植物生物調(diào)節(jié)劑）和維生素等有機成分，母液濃度是實際溶液濃度的5～10倍。配制母液花費時間多，需要用到溶量瓶、移液管等精密儀器，無法由每位學生親自操作，教師可帶領部分學生在課外進行。母液的類型和配制順序如下：
配制母液的注意事項：⑴自來水或河水中含有大量的礦質(zhì)元素，勿用配制母液；⑵配制大量元素和微量元素母液時，應將每種化合物單獨溶解后，再一一混合，同時還應用適量的蒸餾水清洗燒杯內(nèi)壁，并將清洗后的蒸餾水倒入混合溶液中，這樣可以保證每種元素的濃度，混合時要按照教材附表中的順序進行，最后加入的是氯化鈣溶液，這樣可以避免發(fā)生沉淀；⑶配制好的母液要先倒入1000ml燒杯中，再由燒杯轉入1000ml細口瓶中，不可由容量瓶直接倒入細口瓶中；⑷注意觀察母液中是否有絮狀物，出現(xiàn)絮狀物表明離子之間發(fā)生反應，需要重新配制母液；⑸植物生長調(diào)節(jié)劑難溶于水，需要堿或酸助溶，一般生長素類物質(zhì)用堿（0.1mol/LNaOH1～3ml）或酒精（75～95％的酒精1～3ml）助溶，細胞分裂素類物質(zhì)一般用酸（0.1mol/LHCL1～3ml）助溶，加入蒸餾水定溶時要緩慢，也可用水浴法助溶；⑹用棕色細口瓶盛裝有機物母液和植物生長調(diào)節(jié)劑母液，避免透射光損害母液中的有機成分；⑺在瓶壁上貼好各種母液的標簽（下圖所示）；⑻將配制好的母液放入冰箱中或陰涼處保存。
MS是穆拉希吉（Murashige）和斯庫克（Skoog）兩位科學家第一個字母的縮寫，他們于1962年為培養(yǎng)煙草而設計了一種培養(yǎng)基，這就是組培使用中最為廣泛的MS培養(yǎng)基；標簽中間一行的數(shù)字及單位表示的意義如下，例如，100ml/L，即配制1升培養(yǎng)基只需從母液中提取100ml即可；50mg/100ml，表明100ml母液中含有50mg萘乙酸，如取4mg的萘乙酸，只需提取8ml母液。
除母液需提前配制好外，消毒液也需要提前配制好。外植體消毒一般采用75％的酒精、2～10％的次氯酸鈉溶液等。
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