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          高二生物教案:《基因工程的基本操作程序》教學(xué)設(shè)計(jì)(2)

          來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)整理 2018-11-16 20:58:51


            4、

            ①首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 技術(shù)。

            ②其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 ,方法是采用RNA分子雜交技術(shù)。

            ③最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成 ,方法是采用 雜交技術(shù)。

            ④上述三步檢測(cè)為分子水平的檢測(cè),還可以進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定,如抗蟲(chóng)或抗病的鑒定等。

            基因工程的意義:能夠打破生物種屬的界限,即 ,在分子水平上 改變生物的遺傳特性。

            【疑難解析】

            1、核心操作基因表達(dá)載體構(gòu)建的注意事項(xiàng)①載體與表達(dá)載體的區(qū)別:二者都有標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分DNA片段。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了目的基因、啟動(dòng)子、終止子三部分結(jié)構(gòu)②用到的工具酶:既用到限制酶切割載體,又用到DNA連接酶將目的基因和載體拼接,兩種酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵③啟動(dòng)子、終止子對(duì)于目的基因表達(dá)必不可少④目的基因不能單獨(dú)進(jìn)入受體細(xì)胞,必需以表達(dá)載體的方式攜帶進(jìn)去。

            2、DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較

            PCR技術(shù)DNA復(fù)制

            相同點(diǎn)原則堿基互不配對(duì)

            原料四種脫氧核苷酸

            條件模板、能量、酶

            不同點(diǎn)解旋方式DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化

            場(chǎng)所體外復(fù)制細(xì)胞核內(nèi)

            酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶細(xì)胞核內(nèi)的DNA聚合酶

            結(jié)果大量的DNA片段整個(gè)DNA分子

            3、①目的基因檢測(cè),利用DNA分子雜交技術(shù),提取受體細(xì)胞中的DNA,然后高溫解成單鏈,再與同位素標(biāo)記的DNA探針雜交看是否有雜交帶;②mRNA檢測(cè),利用RNA分子雜交技術(shù),目的基因DNA一條鏈(作探針)與受體細(xì)胞中提取的mRNA雜交看是否有雜交帶;③抗原-抗體雜交所用到的抗體是用表達(dá)出的蛋白質(zhì)注射動(dòng)物進(jìn)行免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,并提取出而來(lái)的。

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